狂牛病-BSE-その後
伝達性海綿状脳症（TSE）の研究に関する英国、フランスの最近の状況ちょっと長いので目次がついております(^^).
目次 １。動物工場での医薬品生産とスクレイピー ２。家畜衛生研究所神経病理ユニット ３。中央獣医学研究所 ４。レッデイング大学ジェフ・アーモンド教授 ５。OIE ６。フランス原子力委員会研究所 ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ 昨年はBSE、0157と感染症の領域で大きな事件が続き、なにかとあわただしい年で した。今年はウシ年で、ウシにとっても幸せな年になることを望みたいものです。 ところで、昨年末に予研、霊長類センターの吉川泰弘センター長と昨年末に英国と フランスに行ってきました。国際獣疫事務局OIEで毎年、この時期に開かれるバイオ テクノロジー作業部会に出席する機会に、牛海綿状脳症（BSE）研究の最近の状況を 聞いてくることにしたわけです。 昨年は５月末から厚生省の依頼による英国でのBSE調査、６月のパスツール研究所 でのエマージングウイルス・シンポジウム（BSEについてはリチャード・キンバリン ，成長ホルモンによるクロイツフェルト・ヤコブ病（CJD）はフランスのドミニク・ ドーモントなどの発表がありました）、８月のエルサレムでのOIE主催のBSE診断に関 するワークショップ、それに続く国際ウイルス学会でのジョン・コリンジの基調講演 やいくつかのプリオン病に関するセッションと、BSE問題について計４回、海外出張 したことになりました。今回の旅行は、研究中心で興味ある話がかなり聞けました。 旅行中にマック・パワーブックに入力していたメモの内容は盛り沢山で、これをご紹 介するかどうか、迷っているうちに年が明けてしまいました。 前回までの出張で得られた情報および１０月上旬までに論文発表された主な情報は 、先日、小野寺節先生と共著で出した「プリオン病ー牛海綿状脳症のなぞ」（近代出 版）で取り上げています。しかし、非常に急速に進展している研究領域で、社会的反 響も多く出ていますので、新たに分かった事実をご紹介した方がよいだろうと思い、 今回の旅行で得られた情報をご紹介することにしました。 BSE対策の基礎は科学的事実にもとずくべきですが、政治、経済の要素が入ってく ると、科学的事実にかすみがかかってしまい、マスコミやインターネットを通じて流 される情報に、研究者の生の声が反映されていない面がしばしば感じられます。 そこで、なるべく生の声をご紹介することにしたいと思います。そのためにオーバ ーラップした箇所もあり、また整理が不十分で分かりにくい面があるかと思います。 また、専門的すぎて分かりにくいところもあるかと思いますが、そのようなところは とばしてお読みください。 １。動物工場での医薬品生産とスクレイピー これは本題とは直接の関係はありません。しかし、羊や山羊の乳腺で医薬品蛋白の 遺伝子を発現させて乳の中に医薬品を生産させる動物工場について、スクレイピーに 対する安全対策が関心事になっていますので、ご紹介します。 動物工場のうち、山羊を使用しているジェンザイム・トランスジェニックスの米国 の製造施設、羊を使用しているPPL Therapeuticsの米国の研究所は、昨年の１月に訪 問しています（本講座）。今回は英国エデインバラにあるPPLの生産施設を訪問しま した。 ここで最初に生産段階になったのはアルファ１アンチトリプシン（AAT）です。１ ９９１年に最初に生まれたトランスジェニック羊はトレーシーTracyと命名されまし た（本講座１８、２９回参照）。この子孫が現在では３００頭近くになりAATを生産 しています。１９９７年春には臨床試験といわれています。この方式は極めて低コス トで出来るのが大きな利点です。計算をしてもらったところ、全世界のAATの需要を まかなうには３０００頭の羊で十分ということでした。 このあたりの問題は本講座ですでにご説明していますので、本論に入ります。 羊の乳から医薬品を作ることになると、そこでもっとも関心が集まる問題のひとつ に、スクレイピー汚染の可能性です。 この問題に対するPPLの考え方は以下の５つの点にしぼられています。 １）乳からのスクレイピーが伝達されたことはない。 ２）スクレイピー汚染のない羊を使用している。羊はすべてスクレイピー汚染の存 在しないニュージーランドから輸入したものです。ニュージーランドは１９５０年代 にスクレイピーが入ったことがありますが、根絶され、その後はまったく発生はあり ません。 ３）農場での検疫を厳重に行っている。 ４）乳から医薬品を製造する際のプロセス・バリデーションで、除去効率を調べて いる。 これは製造工程のいくつかの段階に、スクレイピー病原体を加えて除去効率を求め るもので、これの詳細も本講座（２９回など）で以前にご紹介しています。 ５）PPLはニュージーランドに新たに製造施設を作りましたが、現地政府のリスク ・アセスメントの結果、そこへ英国で作成したトランスジェニク羊の受精卵を輸出す ることが承認されました。 ついでですが、トランスジェニック羊は組換え動物であり、封じ込めの対象です。 英国の指針では２重のフェンスで囲うことが封じ込めとみなされています。ここの農 場にはトランスジェニック動物以外に、それを作成するための羊も含めて約２０００ 頭がいますが、農場の囲いは、内側に電気を通した針がね、外側が鉄条網です。これ が産業動物の場合の封じ込めとみなされています。 ２。家畜衛生研究所神経病理ユニットInsitute for Animal Health, Neuropathogene sis Unit (NPU) エデインバラ大学の中にあり、スクレイピー研究でもっとも古い歴史を持ち、現在 はスクレイピーとBSEの基礎的研究の中心です。全部で６０人位の職員、そのうち主 任研究員クラスが１ダースです。 家畜衛生研究所はオックスフォードの近くの村であるコンプトンが本部で、エデイ ンバラのほかにロンドン郊外のパーブライトに海外病の研究所の２つの支所を持って います。私はパーブライト支所で、この７年あまり牛の急性伝染病である牛疫の組換 えワクチンの共同研究を行っています。コンプトンとパーブライトには何回も来てい ますが、神経病理ユニットは今回が初めてでした。 実は昨年の６月初めに厚生省からの依頼による調査旅行の際に訪問するはずでした が、多分行政の人が入っていたためもあるかと思いますが、エデインバラへは忙しく てだめという理由で、NPUの最高責任者である分子生物学部長のクリス・ボストック がコンプトン本部で対応してくれました。ボストックはOIEのバイオテクノロジー作 業部会のメンバーですので、毎年会っている間柄でもあり、インタビューそのものは 非常に役立ちましたが、やはり研究者から直接、研究についての話しが聞けなかった のが残念な気持でした。今回は行政の問題はまったくないので、すんなりと受け入れ てくれました。 たまたま、研究費の申請時期で、その打ち合わせのためにボストックがNPUに来る 日にぶつかってしまったために、時間の調整が大変なようでしたが、かなりみのりの ある討論ができたと思います。そのうちのいくつかの点をご紹介します。 １）新型CJDにみられるBSEのしるし １０月末にロンドン大学インペリアルカレッジのジョン・コリンジが、新型CJDの 患者の脳の中の異常プリオンは、散発型CJDや成長ホルモンなどによる医原病型CJDが １ー３型に分類されるのに対して、別の４型に分類され、これはBSEにかかった牛、 猫、実験的に感染させたサルの場合と同じであることを発表し、初めて新型CJDとBSE の関連を積極的に示唆する成績を示したことはご存じのとおりです（本講座第４８回 参照）。 この成績は新型CJDが疑われるCJD患者に応用できる可能性があると同時に、野外の スクレイピーにBSEタイプのものが存在するかどうかを知るてがかりになると期待さ れています。 NPUのサマービルSommerville（彼は九大医学部動物実験施設の毛利資郎教授がここ に留学されていた際の同僚です）から最新の成績を見せてもらいました。すなわち、 ウエスタン・ブロットでみられる３本のバンド、これは糖鎖の付いていないもの、１ 本付いているもの、２本付いているものから成り立っていますが、糖鎖が１本のもの と２本のものの占める割合を、NPUに保存されている６種類のマウス継代スクレイピ ー株、自然発症スクレイピー、 自然発症BSE牛、マウス継代BSE株で比較してみた実 験です。 その結果、スクレイピー株によって、そのパターンはばらばらで、とてもコリンジ のように４つのタイプには分けられません。とくに注目されるのは、BSEとほとんど 同じパターンを示すスクレイピー株があったことです。これだけですと、このスクレ イピー株はBSEの原因ということにもなりかねませんが、しかし、本講座でも説明し たように、近交系マウスでの潜伏期や脳での病変分布にもとずく株のタイピングで調 べてみると、この株のマウスでの病変プロフィールは、BSEとはまったく異なってい ます。 したがって、コリンジの方法で簡単に野外のスクレイピーの中から、BSEをみつけ ることは、どうも困難なようです。 しかし、コリンジの論文がきっかけになって、プリオン蛋白の糖鎖についての関心 は高まっています。「プリオン病」の中で紹介しましたが、異常プリオン蛋白の糖鎖 構造の解析は、かって、医科研で木幡陽教授と遠藤玉夫さんが行っています。これは プルシナーから送られてきた精製材料を分析したものです。異常プリオン蛋白は沈殿 するので精製が容易であったのですが、正常プリオン蛋白は可溶性であったため、精 製が不十分で解析できませんでした。したがって両者の比較はできていません。 ところが、今度はBSE、CJD、スクレイピーの異常プリオン蛋白の間での糖鎖構造の 比較が問題になってきたことになります。したがって技術的には可能です。木幡先生 の成績を参考にして、この研究をサマービルの上司であるジム・ホープJames Hopeが 、コンプトンの本部の研究室で、すでに準備を始めたとのことです。 やはり考えることは誰でも同じで、材料の揃っているところにはかなわない感じが します。 今回の訪問ではジョン・コリンジの研究室も訪問する予定でしたが、あいにく、私 の希望していた時期にはロンドンに居ないとのことで、これはだめでした。 ２）BSE発生の原因としてのレンダリング方法の変更 レンダリングにより作製された肉骨粉は１９２０年代から家畜に与えられていたに もかかわらず、１９８６年以後、BSEが大発生した理由の説明として、中央獣医学研 究所Central Veterinary Laboratory (CVL)のジョン・ワイルスミス疫学部長の有名 な報告があります。 １９７０年代終わりから８０年代始めにかけて、レンダリングの方法がバッチ法か ら連続法に変えられたことと、有機溶媒での抽出操作が中止されたことのふたつが関 係しているという考えです。とくに有機溶媒での抽出は、この時期に突然ほとんどの 工場で中止になったことから、これが主な原因と推測されました。そして、この考え はさらにオイルショックに結び付けられ、オイルショックがBSE発生の間接的原因で あるという説が世界中に広まりました。「プリオン病」でも、この考え方にもとずい た解説を行っています。 今回、NPUでデイビッド・テイラーDavid Taylorから最新の成績をみせてもらい、 この考え方を若干、修正しなければならないことが分かりました。 テイラーはスクレイピー病原体の不活化研究の第一人者であり、BSEの牛での病原 体の体内分布を調べたのも彼です。BSEの牛では脳、脊髄、網膜のみに感染性があっ て、ミルクなどは安全であるという成績は彼の研究によるものです。 彼はレンダリングでのスクレイピー不活化の効果をパイロットプラントで調べてき ています。その詳細は「プリオン病」に述べてありますので省略しますが、３０００ 頭のスクレイピー羊の脳をレンダリングにかけて調べたところ、有機溶媒抽出した後 でも感染性が残っていたのです。マウスでの感染性の測定による実験であり、わずか の感染性も検出するために９００日間マウスが観察され、１月に実験は完了するとの ことでした。論文が出るのは、それ以後になります。しかし、感染性が残っていると いう結論が変わることはありません。 肉骨粉がBSEの原因であることは、肉骨粉の使用を中止してからBSE発生が激減した ことから、間違いありません。現在の連続法で作られた肉骨粉のすべてから感染性が 見つかっています。とくに悪い成績ではlogで0.5しか減少しなかったものもあります 。しかし、１３０C、３０分間圧力を加えるバッチ法では感染性はまったく検出され ていません。この成績にもとずいて、１９９７年４月からEU はこの方式を要求する ことになったとのことです。この方式は元来、ドイツで行われていたものです。ただ し、スクレイピーを念頭においたものではなく、牛の急性伝染病である口蹄疫の伝播 防止を目的としたものだそうです。 BSE発生の原因として、有機溶媒抽出操作よりも連続法への変更の方が重要だったと 判断されたようです。 ３）BSEの母子感染 昨年の８月１日に英国農漁業食糧省が１９８９年以来CVLで行ってきた６３０頭の 子牛での母子感染に関する実験の中間報告として、１０％位の母子感染があるという 発表を行いました。また、オックスフォード大学のアンダーソン教授のグループは、 その成績にもとずいて２００１年までにBSEの発生はほとんどなくなるという疫学的 推測を発表しました。 NPUを訪問する前日に、かってNPUでスクレイピーの研究のリーダーをつとめ、現在 はスクレイピーに関する国際コンサルタントの仕事をしているリチャード・キンバリ ンRichard Kimberlinが私のホテルを訪ねてきてくれましたので、この問題について 話し合いました。 私は疑問に思っていたのはBSEの牛では、脳と脊髄にしか感染性がみつからないの に、どうして、母子感染が起こるかということです。これは私だけでなく、おそらく ほとんどの人の持つ疑問です。 キンバリンとは昨年の６月にパリでも議論をしたのですが、彼は牛は終末宿主であ り、そのために脾臓などリンパ組織に病原体はみつからないという意見です。そして 、スクレイピーの羊を餌として与えられたことで起きた伝達性ミンク脳症と同じとい う意見です。 BSEの牛では脾臓には感染性はまったく見つかりません。ただし、これは発病して 末期の牛の場合です。この場合には、マウスよりも１０００倍検出感度が高いとされ る子牛へ脳内接種しても、やはり感染性はみつかりません。しかし、ある時期には脾 臓でもわずかに病原体が増えて血液に出る可能性は否定できないのではないかという 意見です。結局、母子感染を起こす機構は、現在の知見からは説明しにくいという結 論でした。 この問題についてテイラーとも話し合いました。彼の話しによれば、この実験の責 任者であるCVLのジョン・ワイルスミス疫学部長が、現在、母子感染の実験結果につ いて結論を出すことは賢明でないと述べているそうです。後述しますが、ワイルスミ スに直接聞いた話では、まさにそのとおりでした。 昨年の６月に私がワイルスミスに会った時にも、コードによるブラインドテストで 行われている実験であって、翌年春まではブラインドを保つつもりだが、はっきりは 名指しはしませんでしたが、コードを開けという圧力が絶えずかかっており、昨日も 圧力がかかったと話していました。かなりワイルスミスは抵抗したようですが、結局 、行政の圧力に負けてコードが開かれ、農漁業食糧省の中間発表になったのが、こと の次第です。 すべての実験が終了し、学術論文として発表されるまで、不十分な成績にもとずく 議論をしてもみのりがないということだと思います。 ４）羊でのBSE BSEの羊への接種実験についてはジム・フォスターJames Fosterから話しを聞くこ とができました。牛でのBSEは、前にも述べたように脾臓にはまったく感染性はみつ かりません。ところが羊では、脳内接種でも経口投与でも、脳、脊髄以外に、脾臓で も感染性がみつかります。しかも、遺伝的にスクレイピーに抵抗性の品種の羊でも発 症し、脾臓にも感染性がみつかります。 したがって、羊でのBSEは脾臓での病原体の増殖の点からみれば、牛のBSEとは異な り、スクレイピータイプということになります。 今のところは牛と羊の間の違いがなぜ起こるのか、この違いの意義はどういうもの か、まったく分かりません。生物学的に興味ある事実としかいえないでしょう。 ５）羊での遺伝的抵抗性とプリオン遺伝子 NPUではデイッキンソンDickinsonの時代から３０年以上にわたって、自然発症スク レイピーに抵抗性の羊の群れと感受性の群れが維持されてきています。羊の数は両方 合わせた約５００頭位が閉鎖コロニーで維持されています。 この抵抗性の違いは現在ではプリオン遺伝子のタイプで決められていることが明ら かになっています。プリオン遺伝子コドン１３６番、１７１番が中心で、そのほか１ ５４番もかかわっています。この領域の研究は日本では帯広畜産大学の品川森一先生 も行っており、NPUの人たちも注目しています。 実用的な面では、抵抗性品種に置き換えることがスクレイピー制圧に役立ちます。 現在、CVLではプリオン遺伝子のタイピングをコマーシアル・レベルで行っています 。CVLは元来は農漁業食糧省に属する国の機関でしたが、サッチャー政権の時代に、 農漁業食糧省に組織改正が行われAgencyとなって、一定限度の利益を得る商売もでき るようになりました。 ところで、私の興味は、人のCJDでは散発型、医原病型（感染型）、遺伝型と３つ の発症機構が分かっています。CJDと同じ病気と考えられるスクレイピーでは、これ まで感染型しかみつかっていません。生物学的に考えれば、散発型、遺伝型のいずれ も存在するはずではないかという疑問です。 この点について、遺伝的抵抗性の研究にかかわっているゴールドマンGoldmannと大 分議論をしてみました。彼の意見では、自然発症のスクレイピーには散発型、遺伝型 が混合していて区別できないのではないかということです。羊の生活環境、寿命など 、人との違いが区別できない原因のひとつになっているかもしれないということです。 スクレイピー発生のまったく存在しないオーストラリアで、CJDのように１００万 頭に１頭の割合でスクレイピーがあるかどうか、このような議論は生物学上は大変興 味あるところですが、実際面ではみのりが少ないのかもしれません。 なお、PPLではクローン羊の作製技術を発展させて、全能性の分割受精卵を遺伝子 操作したのち、その細胞の核を、あらかじめ脱核しておいた未受精卵に移植する方法 を開発し、これでノックアウトマウスに相当する、ノックアウト羊ができるようにな ったと言っています。この方法でプリオン遺伝子を破壊した羊を作ればスクレイピー 抵抗性の羊が出来ます。この方法はこれからネイチャーに投稿するので、それまで詳 細は秘密だそうです。理屈だけは分かりましたが、かなり個々の操作段階での技術的 ノウハウがありそうです。 ６）新型CJDのマウスでのタイピング 「プリオン病」で詳しく述べましたが、５系統のマウスでの潜伏期と脳内病変分布 プロフィールによる株のタイピングが、新型CJDがBSE由来かどうかを決めるもっとも 信頼性のある方法と期待されています。 これはNPUのモイラ・ブルースMoira Bruceが中心になって行っています。今回の私 達の訪問は彼女がすべて調整してくれたのですが、あいにく部長のクリス・ボストッ クが来たために、彼女はそちらの方で忙しくなってしまい、病理のアン・サッテイAn n Suttieが対応してくれました。 CJDの材料での実験は隔離実験室で行われているため、入れませんでしたが、スク レイピーとBSEの実験の方は現場を見せてもらいました。脳内の決められた部位での 空胞変性の程度を光学顕微鏡観察で分類するものですが、いくつもの興味ある病変を みることができました。 とくに慢性消耗性疾患（最初、米国で鹿にみつかった伝達性海綿状脳症です。詳細 は「プリオン病」で説明してあります）に見られるクールー斑は見事なものでした。 ７）ゼラチンの安全性 WHOの専門家委員会ではゼラチンの安全性について、原料である皮や骨に感染性が なく、しかも強い酸と強いアルカリで処置している点から安全であると報告しています。 このうち、強いアルカリ処置、具体的には苛性ソーダ処置は不活化効果が弱いとい う成績をデイビッド・テイラーは発表しています。苛性ソーダに効果があるといった のは米国のポール・ブラウンPaul Brownの古い仕事で彼のデータでは、不活化効果は みられていません。 現在、英国産の牛はゼラチンの原料には使われていないので、現実に問題はありま せん。 しかし、実際にゼラチン製造工程でどれ位、不活化が行われるのかをスパイキング テストによる試験がIveresk Research Inernational という民間研究所が受託研究と して行っています。この研究所は上述のPPLのトランスジェニック動物飼育施設のす ぐそばにありました。 そこでの成績を訊ねたところ、これは秘密だから教えられないということでした。 別の民間団体は次のような推定を行っています。原材料である皮、骨には感染性が 検出されず、頭の骨を砕いた際に感染性のある脳が混入するという最悪の状態でも、 標準の熱湯での脱脂の過程で脳由来の蛋白質の汚染は1/100減少するというゲッチン ゲン大学の成績、およびテイラーの論文でアルカリ処理によりおそらく数１０００分 の１感染価が低下するという成績を参考にしたものです。 この推定では、原材料に病原体が混入した際の感染性の低下は、脱脂で１００分の １、酸処理で数１００分の１、アルカリ処理で数１０００分の１、滅菌で数１００分 の１。総計で１０億分の１の程度になると計算されています。 ３。中央獣医学研究所（Cetnral Veterinary Laboratory:CVL） 農漁業食糧省（Ministry of Agriculture, Fisheries and Food、通称MAFF）の管 轄の研究所で、BSEの最初の発見から、BSE対策のもととなる研究のほとんどが、ここ で行われています。 その中心はジョン・ワイルスミスJohn Wilesmith疫学部長、ジェラルド・ウエルズ Geral Wells神経病理部長です。科学的な成果を行政に反映させる役として、ウエル ズの前任者のレイ・ブラッドレイRay BradleyがBSEコンサルタントをつとめています 。EUの会議で農漁業省大臣のとなりに座って助言をしているのは彼です。 前回の訪問の際は、ブラッドレイはブラジルに出かけて留守で、ワイルスミスとウ エルズが対応してくれました。今回はウエルズがオーストラリアに出かけていて留守 でした。しかし、前回のBSE危機の際にはワイルスミスは１時間位でブラッセルでのE Uの会議に出かけるという慌ただしい状況でしたが、今回は、幸い、EUからの呼び出 しがなく、しかも研究者同士のミーテイングであったため、時間的にも内容的にも充 実した訪問になりました。もっとも、ワーキングランチを含めて５時間ぶっ通しでし たので、いささか疲れました。 ここでの話しの中で、差し障りのない点をまとめてご紹介します。 １）新型CJDとBSEの関連 新型CJDがこれまでに知られていないタイプであることは間違いなく、その原因の 候補としてBSEがあり、その点についての証明はまだ出来ていないというのが、現状 という理解です。 彼の論文は新型CJDの異常プリオンがBSEに似ている点を示唆したもので、両者のつ ながりまでは述べてなく、間違った解釈で引用されているという意見です。コリンジ の論文については、スクレイピーのデータが抜けている点を指摘しています。これは NPUの成績で明らかなように、新型CJDと同じようなタイプがスクレイピーで見つかっ たことに関連していると思います。 状況証拠から考えると、BSEが人に感染するとすればハイリスクの人は、屠畜場従 業員がまずあげられます。多いところでは週３０００頭の牛が屠殺され、ふたりで鋸 で脊髄をカットし、また頭蓋骨を切り開くので、膨大な量のエアロゾルにさらされる ことになります。もっとも高い危険性ということになるというわけです。 BSEの診断は英国全土の１５ケ所の獣医診断センター（Veterinary Investigation Center）で行われています。ここで、これまでに１６万４０００頭が解剖されていま す。BSEの問題が起こるまでは、リステリアなどの人獣共通感染症の防止のために簡 単な防護をしていたにすぎず、年とともに厳重な防護が行われるようになってきたの で、当初この作業にたずさわった人はかなり大量のBSE病原体にさらされたとみなさ れます。食肉業者も同様です。しかし、これらの人々で新型CJDはまったく出ていま せん。したがって、これらの所見からは新型CJDの原因がBSEであるとは考えにくいと いう意見でした。これは、かってスクレイピーとCJDの関連が疫学的に考えにくいと いう議論が行われたのに似ています。 したがってコリンジの成績からただちに判断を下すべきではないと言っていました。 そしてコリンジのトランスジェニックマウス（ヒトプリオン遺伝子発現マウス）が BSE接種後、５００日以上生存している点が心強いという意見です。 ２）母子感染 胎盤からの感染の可能性については、BSE発症妊娠牛の胎盤を牛に接種した実験が 行われていますが、６年以上たった現在、まだ発症していません。したがって胎盤か らの感染の証拠は得られていません。 ８月に農漁業省が発表した母子感染に関する中間報告が出された経緯については、 「プリオン病」でも触れましたが、行政の圧力によるものです。この実験の責任者で あるジョン・ワイルスミスに私が６月に会った時に、圧力があって大変なストレスに なっていることをもらしていましたが、今回、その経緯を詳しく聞くことができました。 コードを開けという圧力があった時に、研究者の間での議論になった点は次のとお りです。ブラインドテストで行われていたこの実験で、コードを開いて中間報告を出 す理由があるとすると、それは、もし母子感染が高率に起きていて、多数のBSE感染 子牛が生まれることがあれば、公衆衛生上の重要な問題になるため、海綿状脳症委員 会から政府に報告しなければならないという観点のみでした。 しかし、すでに胎盤、乳に感染性が検出されていないことから、母子感染の可能性 は考えにくいとされていました。ただし、この実験が開始された１９８９年には、胎 盤や乳についての感染性の有無はまだ不明でした。 実験途中で成績を発表することは混乱を招くだけで、得るものは何もないというこ とが予測され、研究の信頼性も損なわれるという観点から、研究者側は抵抗したので すが、結局、コードを開いて中間成績を発表したといういきさつです。結果的には、 予想通り、現在、この実験の成績の解釈をめぐって混乱が起きてしまっています。す なわち、胎盤、乳に感染性がないのに、なぜ母子感染が起きるのかという母子感染の メカニズムについての議論が起こり、インターネットでも勝手な意見がのせられてい ます。 汚染餌にさらされた状況、BSEに感染を起こしやすい遺伝因子の有無、その他いろ いろな要因の解析は全部のデータを集めて解析しなければ結論がでないという話しで す。この実験は本来、集団レベルで母子間における危険因子を調べるものであって、 母子感染のメカニズムを調べるというものではないのが、いまや母子感染メカニズム が勝手に取りざたされている状態というわけです。 ワイルスミスは沢山のスライド原図のファイルから（１０００枚位ありますかと聞 いたら、数千枚あると言っていました）、生データを示して詳しく説明してくれまし た。現在、危険因子として示唆されているのは、汚染餌にさらされた可能性です。 この母子感染の実験は１９８８年ー１９８９年に生まれた子牛を１４名の獣医が、 BSE発症牛と健康な牛、それぞれからの子牛のペアを集めて行われたもので、１９８ ９年１１月末にやっと３００組（３００以上の農場から）になったそうです。この集 める仕事では疲れ果てたと言っていました。飼育は農漁業省付属の実験農場３ケ所で 行われました。２週間前に一番若い牛が７才令になって、全部殺処分されました。全 部のデータの解析が終わるのは１９９７年の１月末です。ここで、どのような結果に なるか待つことになります。現時点で母子感染があるといった議論は意味がないとい う結論でした。 母子感染の機構にかかわる実験としては、胎盤、乳で感染性がみつからないという 成績があります。ひとつ抜けているのは、初乳です。野外からBSE発症牛の初乳を集 めていますが、かなり大変な仕事といっています。初乳からの感染を否定する状況証 拠としては、肉牛の成績があります。「プリオン病」に詳しく書きましたが、乳牛の 子供はすぐに代用乳に変えられます。ところが肉牛の場合は生後１か月まで母牛の乳 で育てられています。すなわち、初乳もたっぷり飲ませてもらっているわけです。BS E発症牛から生まれ肉牛として育てられた子牛２１９頭で追跡したところ、１３２頭 が成牛に育ち、BSEになった子牛は１頭もいないし、８３頭は現在もまだ元気でいる ということです。すなわち、これらの子牛では初乳からの感染は起きていないという ことになります。 初乳に感染性があったという報告は１例だけ日本で出されています。CJD患者の母 親が出産した際の初乳に感染性がみつかったというものです。 牛での母子感染があったという農漁業省の発表から、今度は人で子供への母子感染 に議論がEUで盛んに行われています。その際に玉井先生の論文がかならず引用されて おり、今では、ワイルスミスの論文よりも有名だそうです。 ３）発病機構に関する実験 子牛にBSE発症牛の脳乳剤を与えて４か月毎に殺処分して４４種類の組織を集めて 、感染性の有無をマウスへの脳内接種で調べる実験で、現在２２か月令のところにな っています。小腸で割合高いレベルの感染性がみつかっています。これが一時的な現 象か、ずっと続くものかは、まだ分かりません。 食べた病原体がどのようにして脳に到達するのかが、BSEではとくに疑問ですが、 小腸からの経路があれば、北本先生たちがCJD感染マウスの成績と同じになるかもし れません。 別の実験で、BSE牛の脳乳剤を１、１０、１００グラム、または１００グラム３回 食べさせる実験が行われており、５６か月になっています。これらの牛で小腸に感染 性がみつかるかどうかも、ひとつの手掛かりになります。 ４）羊でのBSE NPUでの実験で、スクレイピー抵抗性の羊でもBSEの実験感染が成立することが明ら かになりました。羊も牛と同様にBSEに汚染した肉骨粉は与えられていましたから、 羊でもBSEが存在しているが、実際にはスクレイピーでマスクされているのではない かという議論があります。 コリンジがウエスタン・ブロットでBSEのしるしが区別できるという論文を発表し たことで、羊のスクレイピーとBSEが区別できるのではないかと期待されました。と ころが、前述のようにNPUでの実験で、これはだめということが明らかになりました 。現在、可能なのは、やはり、マウスの脳内に接種して病変プロフィールを調べる株 のタイピングしかないことになりました。 現在、羊での自然発生スクレイピーの多数のサンプルについて、脳と脾臓をマウス での株タイピングと羊のプリオン遺伝子型を調べる実験がで行われています。この中 で、スクレイピーに遺伝的に抵抗性の羊（プリオン遺伝子のコドン１３６がアラニン ・タイプ）があれば、それはBSEの可能性があるということになります。 これも問題があってNPUの実験では、９つのスクレイピー分離株はマウスへの継代 ができていません。したがって、これらは株タイピングができないことになります。 マウスへ伝達できないスクレイピー株としてはCH1641株があります。 羊でのBSEが現在、大きな問題になってきていることは今度会った人たちが皆、認 めています。これまでは実験的にBSE が羊に伝達できるかという疑問であったのが、 BSEは羊で自然感染を起こしているかという疑問に変わったわけです。 疫学的には、この可能性は次の理由から少ないと考えられています。 まず、羊ではスクレイピーに対する抵抗性は年令が増すにつれて高くなります。そ して、羊では乳牛の場合のように代用乳が用いられることはなく、母親の乳で育てら れています。乳離れした時には、スクレイピー抵抗性は高くなっているということが 考えられます。また、ほとんどの羊はイースターの料理用として５ー６か月令で屠殺 されていますので、長い潜伏期のBSEの発症前にほとんど殺されることになります。 しかし、安全を期するために英国とフランスでは牛の場合と同様に、羊でも特定臓 器を食肉から除外する措置がとられました。英国では羊の頭を取り除く方式です。こ の場合、脊髄はとくに対象になっていません。しかし、現実には食肉業者が商業上の 理由でラム・チョップから脊髄を取り除いているそうです。フランスでは１才以上の 羊と山羊から脳、脊髄を除去しています。 ５）豚およびニワトリでのBSE 豚には脳内接種で伝達されています。経口の場合には「プリオン病」を書いた時に は、試験継続中としましたが、６年以上経った現在までのところ症状を出して死亡し たものはいません。病変も見いだされていません。 ニワトリでは脳内接種でも伝達ができていません。経口の場合は試験継続中と「プ リオン病」には書きましたが、はっきりした変化は見られていないそうです。ただし 、ニワトリでは５才以上のものについて、これまで病理を調べた経験がないので、こ のような老齢のニワトリの正常の脳の組織像についてのバックグラウンド・データが ないそうです。 ６）安全対策 BSE牛についての解剖は研究以外には行っていません。感染の危険性があるからで す。英国ではBSEはヒト病原体とみなされて安全対策がとられています。 診断の場合には、延髄だけを取り出します。延髄にはかならず空胞変性が見つかる からです。症状を示した牛は焼却場に連れてこられて、そこで注射で殺処分され、頭 だけを切り離します。残りはその場で焼却にまわされます。頭は獣医検査センターに 運ばれ、そこで延髄だけが特別の器具で取り出され、ホルマリン固定され、病理組織 検査にまわされる手順になっています。 英国では病原体取り扱いに関するガイドラインが危険病原体諮問委員会（Advisory Committee on Dangerous Pathogens: ACDP）で作成されています。ここで伝達性海綿 状脳症の場合のガイドラインが今度、作成されました。 Advisory Committee on Dangerous Pathogens: Precautions for work with human and animal transmissible encephalopathies. Department of Health, Room 538B Skipton House 80, London SE1 6LW 上記に手紙を出せば分けてもらえます。ここは海綿状脳症諮問委員会の事務局です 。価格はいずれも５ー６ポンドです。 ４。レッデイング大学ジェフ・アーモンドJeffrey Almond教授 CVLでの５時間におよぶインタビューの後、１時間位のドライブでレッデイング大 学にジェフ・アーモンドを訪問しました。 彼は分子生物学とくにポリオウイルスの分子生物学で有名です。東大医科研の野本 明男先生は良く知っていると言っていました。伝達性海綿状脳症の研究計画の委員長 であり、政府の１３名からなる海綿状脳症諮問委員会のメンバーのひとりです。 今回、会ったリチャード・キンバリンとレイ・ブラッドレイも委員ですが、彼は専 門外のいわゆる学識経験者として委員になっています。 伝達性海綿状脳症についての各種の科学研究費の現状を説明してもらいましたが、 これは省略します。 １）海綿状脳症諮問委員会Spongiform encephalopathy Advisory Committee: SEAC これは１３名の科学者から構成され、事務局は保健省と農漁業食糧省の両方が受け 持っています。ここでの勧告が政府に答申され、いろいろな行政措置がとられています。 日本に入ってくる情報の多くは、行政措置から逆に科学的側面を推定するような場 合が多く、科学者からの直接の声がほとんど伝わっていないように思います。 ところで、昨年の３月２０日の英国政府の発表にいたる経緯について次のような生 々しい話しをしてくれました。私のメモですので、すべてが正確かどうかは保証でき ませんが。 １月３日に委員会が開かれ、委員のひとりでCJD調査委員会委員でもあるアイオン サイドIronsideから新型CJDが疑われる患者のニュースが報告されました。 ３月８日に新型CJDについてのデータが委員会で発表されました。爆弾が落とされ たような衝撃であったとのことです。病変のスライドは委員会以外の５人の神経病理 学者に調べてもらうことになりました。 ３月１６日（土曜日）の委員会で、もっとも可能性のある原因がBSEであるという 結論に委員会は合意しました。これはポリテイカル・ダイナマイトでした。日曜日に 政府に報告され、月曜日に大臣から閣議で報告されました。 ３月１９日（火曜日）に委員は全員ホワイト・ホール（政府の建物）に集められ、 ミルクの安全性など３月２０日午前まで激論が行われ、午後の政府発表になったとい う次第だそうです。 この発表に対しては、オーストラリアから国際的な相談なしに行われたというクレ イムが来たそうです。 ２）英国政府の論理 １９８８年の時点で次の２つが考えられました。 まず、１。安全性が証明されるまでは危険とみなすという立場です。この場合、す べての牛を殺さなければならず、総予算は３００億ポンドにもなります。 ２。次の考えとして、危険性が証明されるまでは安全とみなすという立場です。こ れは非倫理的です。 ３。そこで、両者の中間をとった考えが出てきました。それはまず、すべての牛が 感染していると仮定して、病原体が含まれる特定の臓器を食用から除外する措置です 。これで危険性はミニマムになるという考えです。 そこで、当面は３の立場で対応し、１か２の答えが出たら、そちらに移るというの が、英国政府の対応の基礎ということです。 ３）新型CJDとBSEの関連 コリンジが新型CJDにBSEのしるしがあるという論文を発表した後に開かれたSEACで は、両者の関連はほとんど疑いないという発言があり、とくに反対の声は出なかった そうです。英国では物事を断定的に表現すると、後で裁判の時に問題になるので、こ の際の発言はbeyond doubtで、ほぼ確実といったニュアンスです。 その理由は３つあります。患者発生の時期と場所がBSEに関連していること、BSE接 種されたサルで新型CJD同様の花模様のクールー斑が存在すること、それとコリンジ が示したBSEのしるしです。 両者の関連の仕方には次の３つが考えられます。 （１）原因XがBSEを起こし、BSEが新型CJDを起こした。 （２）原因XがBSE、新型CJDそれぞれを起こした。 （３）原因XがBSEを起こし、BSEがY (?)を起こし、それが新型CJDを起こした。 ５。OIE 国際獣疫事務局（OIE）は別名、World Organization for Animal HealthすなわちW HOが人間の健康を対象とするのに対して動物の健康を対象とする国際機関です。WHO とは異なり国連とは関係ありません。国連より古い歴史があり、３年前に７０周年を 迎えています。現在、１４３か国が加盟し、家畜感染症を中心とした国際対策を検討 しています。各国の獣医行政のトップChief Veterinary Officer (CVO)が総会のメン バーで、日本からは農水省畜産局衛生課長が参加しています。 ここには４つの作業部会があり、そのひとつであるバイオテクノロジー作業部会に 私は属していて、毎年冬に、その会議に出席しています。部会のメンバーは全部で７ 名ですが、偶然、その大半がBSEに関係しています。部会長のジョン・ゴーハムJohn Gorhamは元ワシントン州立大学教授で現在は米国農務省の顧問のような立場ですが、 スクレイピーと伝達性ミンク脳症の研究で有名です。１９９１年にWHOが開いたBSEに 関する専門家委員会の座長もつとめています。部会の記録担当で中心的役割を果たし ているのは英国家畜衛生研究所のクリス・ボストックです。彼は前述のとおり、英国 でのBSE研究の中心になっています。もうひとりはアルゼンチンのウイルス研究所の 所長であるアレックス・シューデルAlexandra Schudelで、彼はアルゼンチンでのBSE 対策に関する委員会の委員長です。１９９３年からアルゼンチンの牛で、中枢神経症 状を示したもの、１３００頭あまりについて病理検査を行った成績などにもとずいて 、アルゼンチンがBSEフリーであるという情報を世界各国に提供しています。私を含 めて７名の委員のうち４名がBSEに深く係わっていることになります。さらに、もう ひとりの委員、フランス農業研究所CNEVAの牛病研究所のムウサMoussaも、行政の方 からBSEに関する研究を行うよう指示されているとのことです。 BSEは我々の作業部会の議題ではありませんが、休憩時間にはやはり大きな話題に なり、それぞれの国の研究で問題になっている点がいくつか話されました。 OIEは最近、伝達性海綿状脳症に関する臨時委員会を結成しました。メンバーは８ 名です。ほとんどが世界各地域の獣医研究所の所長クラスで、専門家としては上述の BSEコンサルタントであるCVLのレイ・ブラッドレイ、CJD調査委員会のロバート・ウ イルRobert Will、米国で野外のスクレイピーの調査活動の中心になっているリンダ ・デトワイラーLinda Detwilerが参加しています。昨年の１０月８ー１０日に伝達性 海綿状脳症の今後の研究と疫学調査についての会議が、WHOとFAOも参加して開かれま した。世界各地からオブザーバーが参加し、日本からは家畜衛生試験場の久保正法先 生が出席されています。診断、病原体本体についての基礎研究、疫学調査、実験技術 面での国際協力の各分野で、沢山の勧告が出されています。近いうちにOIEの機関誌O IE Scientific and Technological Reviewに報告が掲載されます。 ６。フランス原子力委員会研究所 原子力委員会とプリオン病のつながりは、不思議ですが、ここのドミニク・ドーモ ントDominique Dormontは１９７８年からスクレイピーの研究を行っており、最近で は、彼のグループのラスメザスLasmezasがBSE牛の脳をカニクイザルに接種して、新 型CJD患者の脳にみられる花模様のクールー斑が見られたことを発表して話題になっ ています。フランスでプリオン病研究の中心になっているのがドーモントですので、 ここを訪ねました。 パリ郊外のフォンテネオーローゼFontenay aux Roses日本語では多分、「ばらの泉 」に原子力委員会のキャンパスがあります。軍の施設で、入る時にはパスポートをあ ずける非常に厳重な場所です。このようなところで、プリオン病の研究が行われてい るのは、なんとなく不思議な感じがします。 １）BSEのサル感染実験 脳内実験の成績はすでにネイチャーに報告されていますが、雑誌が出る前に原子力 委員会がマスコミに発表したために、内容が大幅にカットされ、通信欄に簡単な報告 が出ただけです。詳しい報告は改めて別の雑誌に出る予定だそうです。興味があった のは、ここで用いられた３頭のカニクイザルのプリオン遺伝子ですが、いずれもコド ン１２９番はメチオニンで、新型CJD 患者と同じでした。 多くの人が興味を持っている経口感染の実験は、静脈内接種の実験とともに２ー３ か月後に始める予定です。この際に、CJD、スクレイピーを対照に置くことになって います。 最初のサル感染実験では、生まれた直後のサルが使用されていますが、成熟したサ ルと比べて、潜伏期は同じでしたが、病変、すなわち、海綿状変性、クールー斑、グ リアの増生いずれも、はるかに強い結果が得られています。 また、サルでの継代実験も準備されています。 ２）新型CJDの株タイピング NPUの方式に従って、新型CJD（フランスでは１例が見つかっています）、散発型CJ D、スクレイピーについて、株タイピングの準備を進めています フランスの新型CJDで興味があるのは、この患者では脾臓に異常プリオン蛋白が見 いだされていないことです。これはBSE牛の場合と同じです。 ３）成長ホルモンによるCJD 現在計４８名みつかり、そのうち４６名はプリオン遺伝子がメチオニンまたはバ リンのホモ、２名がヘテロ（これらは今年発生した患者）です。ヘテロではアミノ酸 配列の異なる２種類のプリオン蛋白が存在しており、その結果、発病が遅れると推測 されています。したがってこれからヘテロの患者が出てくる可能性があると考えられ ています。 ４）その他 硫酸ポリアニオン、アンフォテリシンBなどでの治療実験、SCIDマウスでの発病機 構の研究、培養神経系細胞でのプリオン蛋白発現への成長ホルモンの影響など、多方 面の研究が行われているとのことでした。
Topへ戻る Zoonoses講義一覧へ戻る
Click
here to Home Page